FDA第一个获批上市溶瘤病毒单药Imlygic的CMC解读

6月19日，复诺健生物研发的用于治疗晚期肝细胞癌的溶瘤病毒产品VG161被FDA授予快速通道资格（FTD）；

6月22日，滨会生物宣告其溶瘤病毒候选药物BS001（OH2）注射液同样被FDA授予FTD，用于治疗抗PD-1单抗治疗后耐药或进展的不可切除的Ⅲ期或IV期黑色素瘤；

7月16日，威溶特医药的静脉注射溶瘤病毒M1产品（VRT106）在日本获批开展晚期实体瘤的临床试验；

7月27日，诺惟生物的重组NV-A01腺病毒注射液获得NMPA临床试验默示许可，

8月30日，因美未来生物自主研发的YH01注射液经NMPA获批开展临床；

10月8日，锤特生物的重组人nsIL12溶瘤腺病毒注射液BioTTT001获批IND。

近日，溶瘤病毒药物的研究捷报频传，不少项目先后在国内外获批开展试验研究，溶瘤病毒疗法的市场正在逐渐扩大。但理想与现实是有差距的，截至目前，全球已上市溶瘤病毒药物仅有4款，其中最广受认可的为FDA于2015年批准上市的首款也是唯一一款HSV-1溶瘤病毒单药Imlygic，该药同年也在欧盟获批上市。

相较于其他类基因药物近几年如火如荼的研发进展，溶瘤病毒领域似乎有些不尽如人意，科学知识不足、获批药物少、参考法规有限等等这些问题都给溶瘤病毒药物的审评上市带来了不少挑战。因此科志康将对Imlygic这款成功在美欧上市并带来极高收益的药物进行CMC解读，以期能为行业者提供参考。

Imlygic的审评里程碑

Imlygic是一种减毒1型单纯疱疹病毒 (HSV1)，它通过基因修饰来实现在肿瘤细胞中进行选择性复制并表达免疫刺激蛋白M-CSF，从而达到治疗黑色素瘤的作用。

在FDA申请上市时便被授予突破性疗法认定，从递交BLA到成功获批上市耗费了15个月左右的时间，期间由于出现CMC方面的重大修订而使审评时间又延长了三个月。虽然FDA方面并没有直接公布出现的CMC问题，但结合其欧盟上市的审评报告内容，推测原因可能与工艺变更相关，具体见下文分析。

Imlygic的生产工艺

如下图所示，Imlygic的生产工艺包括细胞扩增、病毒感染和生产（滚瓶）、收获、回收、纯化，之后进行无菌稀释步骤中用稀释缓冲液配置至目标浓度进行处理，将得到的制剂药物无菌灌装到小瓶中，并用塞子和盖子密封小瓶。需要注意的是，在使用受控速率冷冻前，需进行目视检查并贴上标签。成品药品将冷冻储存在-80℃±10℃条件下。

Imlygic的CMC策略

众所周知，溶瘤病毒一般是具有复制能力的活病毒，在生产工艺、质量研究和控制、保存运输，以及临床使用等方面均面临诸多挑战，因而为了确保安全性，安进公司从生产用物料、生产工艺过程控制、质量标准和稳定性研究等多个层面进行严格把控，采用合理的方法和手段进行监测，确保产品全生命周期的安全性。

1.物料控制

（1）生产中使用的所有原材料均由经批准的供应商提供，并根据既定程序进行鉴定、测试和放行。

（2）通过限制酶消化分析或DNA测序法对用于制备病毒种子的质粒结构进行确认，并在申请资料中详细描述单克隆技术构建质粒与病毒的过程。

（3）对于该药物的商业化生产，申请人使用了三个工作细胞库（WCB），它们来自两个不同的主细胞库，但都源于相同的亲代 WHO Vero细胞库。新旧MCB均已依据ICH Q5D和Q5A（R1）及欧洲药典建议进行了充分表征和鉴定，比较表征结果表明，新旧细胞库的性质基本相似。

2.生产工艺开发

Imlygic的开发过程中使用了三种生产工艺，分别为A、B和C。

•工艺A批次：用于非临床毒理学研究、早期Ⅰ期研究

•工艺B批次：用于其它非临床毒理学研究和Ⅱ期临床研究

•工艺C批次：用于Ⅲ期研究与商业化产品。

不同工艺批次间的可比性已得到充分证明。工艺A到工艺B的变更，其可比性研究评估的结果在最初的临床试验申请时提交。工艺B和工艺C之间的分析可比性，以及工艺C在设施和设备改造前后的分析可比性在后续的递交资料中也已充分说明。

3.质量标准

关于Imlygic的质量标准，在美欧两地区的审评报告中均未公开，但溶瘤病毒药物的质量项目大同小异，参考CDE发布的《溶瘤病毒产品药学研究与评价技术指导原则（试行）》（2023年第2号》，质量标准基本都涵盖所有与产品安全性、有效性相关的检测项目，一般包括鉴别、纯度和杂质、含量、生物学活性、污染物和一般检项等。

审评报告中提到，安进对质量检测的场地进行了评估。基于评估结果，将某些原液的检测项目，诸如工艺相关杂质检测和安全性检测，转移至上游作为关键的过程内控制。

并且采用了三种不同方法来检测药物效价，共同评估了病毒的关键生物学功能：靶细胞的感染、hGM-CSF的含量和hGM-CSF的生物活性。

另外，安进还通过评估感染性颗粒与病毒蛋白的比值来控制药品质量。由于已经建立总病毒蛋白和总病毒颗粒之间的相关性，前者被认为是后者的合适替代物。因此通过评估感染性颗粒与病毒蛋白的比值也能涵盖感染性颗粒与总颗粒的比率。

4.稳定性研究